Premix Probe qPCR multipleks
Nomor Kucing: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Berbasis Pewarna) adalah pra-solusi untuk amplifikasi PCR kuantitatif 2x real-time yang ditandai dengan sensitivitas dan spesifisitas tinggi, berwarna biru, dan memiliki efek penambahan sampel.Produk ini adalah reagen pra-campuran 2× Campuran yang memungkinkan hingga empat reaksi PCR kuantitatif fluoresen dalam satu sumur reaksi.Produk ini mengandung metode antibodi yang dimodifikasi secara genetik untuk mengaktifkan enzim Taq, sehingga sangat meningkatkan sensitivitas dan spesifisitas amplifikasi.Pada saat yang sama, produk ini telah mengoptimalkan buffer multi-reaksi secara mendalam, yang dapat meningkatkan efisiensi amplifikasi reaksi dan mendorong amplifikasi efektif templat konsentrasi rendah.Produk ini dapat digunakan untuk analisis kuantitatif genotipe dan multipleks.
Spesifikasi
| Mulai Panas | Start panas bawaan |
| Metode deteksi | Deteksi probe primer |
| metode PCR | qPCR |
| Polimerase | Taq DNA polimerase |
| Jenis sampel | DNA |
Kondisi penyimpanan
Produk dikirim dengan es kering dan dapat disimpan pada -25~-15℃ selama 2 tahun.
instruksi
1. ReaksiSistem
| Komponen | Volume (µL) | Konsentrasi Akhir |
| 2× Campuran Master qPCR multipleks TaqMan | 12.5 | 1× |
| Campuran primer (10 mol/L) a | × | 0,1 - 0,5 mol/L |
| Campuran probe (10 mol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Pewarna referensi Rox | 0,5 | 1× |
| Templat DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | hingga 25 | - |
Catatan:Aduk rata sebelum digunakan untuk menghindari gelembung berlebihan akibat guncangan yang kuat.
A.Konsentrasi primer: Campuran Primer mengandung beberapa pasang primer, biasanya masing-masing primer pada konsentrasi akhir 0,2 mol/L dan juga dapat disesuaikan antara 0,1 dan 0,5 mol/L jika diperlukan.
B.Konsentrasi probe: Probe Mix berisi beberapa probe dengan sinyal fluoresensi berbeda, dan konsentrasi setiap probe dapat disesuaikan antara 50 dan 250 nmol/L sesuai dengan situasi spesifik.
1.Referensi pewarna Rox: Digunakan pada instrumen amplifikasi PCR Waktu Nyata seperti Applied Biosystems untuk memperbaiki kesalahan sinyal fluoresensi yang dihasilkan antar sumur;produk ini tidak mengandung referensi pewarna Rox.Cas#10200 direkomendasikan jika diperlukan.
2.Pengenceran templat: qPCR sangat sensitif, dan disarankan untuk mengencerkan templat untuk digunakan.Jika templatnya adalah larutan stok cDNA, volume templat tidak boleh melebihi 1/10 dari total volume.
3.Sistem reaksi: 25μL,30μL atau 50 μL direkomendasikan untuk memastikan efektivitas dan pengulangan amplifikasi gen target.
4.Persiapan sistem: Harap persiapkan di bangku super bersih, dan gunakan ujung dan tabung reaksi tanpa residu nuklease;disarankan untuk menggunakan tip dengan kartrid filter.Hindari kontaminasi silang dan kontaminasi aerosol.
2.Program reaksi
| Langkah siklus | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Denaturasi awal | 95℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 95℃ | 15 detik | 45 |
| Anil/Ekstensi | 60℃ | 30 detik |
Catatan:
1.Annealing/Extension: Suhu dan waktu dapat diatur secara tepat sesuai dengan nilai Tm primer yang dirancang.
2.Akuisisi sinyal fluoresensi: Waktu akuisisi sinyal fluoresensi yang diperlukan untuk instrumen deteksi qPCR berbeda berbeda, silakan atur sesuai dengan batas waktu minimum.Waktu beberapa instrumen umum diatur sebagai berikut:
20 detik: Biosystems Terapan 7700, 7900HT, 7500 Cepat
31 detik: Biosistem Terapan 7300
32 detik: Biosistem Terapan 7500
Catatan
Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda!
