Kelas GMP Ultra Nuklease
Nomor Kucing: HC2016A
Tingkat UltraNuclease GMP diekspresikan dan dimurnikan dalam Escherichia coli (E.coli) melalui rekayasa genetika dan disiapkan di bawah lingkungan GMP.Hal ini dapat mengurangi viskositas supernatan sel dan lisat sel dalam penelitian ilmiah, meningkatkan efisiensi pemurnian protein dan meningkatkan penelitian fungsional protein.Produk ini juga dapat mengurangi residu asam nukleat inang ke tingkat pg, meningkatkan kinerja dan keamanan aplikasi produk biologis termasuk pemurnian virus, pembuatan vaksin, dan pembuatan farmasi protein/polisakarida.Selain itu, produk ini juga dapat digunakan untuk mencegah penggumpalan sel mononuklear darah tepi manusia (PBMC) dalam terapi sel dan pengembangan vaksin.
UltraNuclease disediakan dalam bentuk reagen yang disterilkan, dielusi dalam buffer (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin), dengan tampilan cairan transparan tidak berwarna.Produk ini diproduksi dengan persyaratan proses GMP dan disediakan dalam bentuk cair.
Komponen
Kelas UltraNuclease GMP (250 U/μL)
Kondisi penyimpanan
Produk dikirim dengan es kering dan dapat disimpan pada suhu -25℃~-15°C selama dua tahun.
Jika produk dibuka dan disimpan pada suhu 4℃ selama lebih dari seminggu, kami sarankan untuk menyaringproduk untuk mencegah kontaminasi mikroba.
Spesifikasi
| Tuan Rumah Ekspresi | E. coli rekombinan dengan gen UltraNuclease |
| Berat molekul | 26,5 kDa |
| titik soelektrik | 6.85 |
| Kemurnian | ≥99% (SDS-HALAMAN) |
| Penyangga Penyimpanan | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% gliserin |
|
Definisi Satuan | Yang dimaksud dengan satu Unit aktivitas (U) adalah jumlah enzim yang digunakanmengubah nilai serapan ΔA260 sebesar 1,0 dalam 30 menit dalam 2. 625 mLsistem reaksi pada 37℃ dengan pH 8,0 (setara dengan pencernaan sempurna37 μg DNA sperma salmon menjadi oligonukleotida). |
instruksi
1. Sampel Koleksi
Sel yang melekat: buang medianya, cuci sel dengan PBS, dan buang supernatannya.
Sel suspensi: kumpulkan sel dengan cara sentrifugasi, cuci sel dengan PBS, sentrifugasi pada 6.000rpm selama 10 menit, kumpulkan pelet.
Escherichia coli: kumpulkan bakteri dengan cara sentrifugasi, cuci sekali dengan PBS, sentrifugasi pada 8.000rpm selama 5 menit, dan kumpulkan pelet.
2. Perlakuan Sampel
Perlakukan pelet sel yang dikumpulkan dengan buffer lisis dengan perbandingan massa(g) terhadap volume(mL)1:(10-20), atau dengan metode mekanis atau kimia di atas es atau pada suhu kamar (1g pelet sel mengandung sekitar
109 sel).
3. Perawatan Enzim
Tambahkan 1-5mM MgCl ke sistem reaksi dan sesuaikan pH menjadi 8-9.
Tambahkan UltraNuclease sesuai perbandingan 250 Unit untuk mencerna 1 g pelet sel, inkubasi pada suhu 37℃ selama lebih dari 30 menit.Silakan lihat formulir “Waktu Reaksi yang Direkomendasikan” untuk memilihdurasi pengobatan.
4. Supernatan Koleksi
Sentrifugasi dengan kecepatan 12.000 rpm selama 30 menit dan kumpulkan supernatannya.
Catatan: Jika larutan bersifat asam atau basa, atau mengandung garam, deterjen, atau konsentrasi tinggidenaturant, harap tingkatkan dosis enzim atau perpanjang waktu perawatan.
Kondisi reaksi yang direkomendasikanaktif
| Parameter | Kondisi Optimal | Kondisi Efektif |
| Mg²+Konsentrasi | 1-5mm | 1-10mm |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Suhu | 37℃ | 0-42℃ |
| Konsentrasi DTT | 0-100 mm | >0 mm |
| Konsentrasi Mercaptoetanol | 0-100 mm | >0 mm |
| Konsentrasi Kation Monovalen | 0-20mm | 0-150mm |
| Konsentrasi Fosfat | 0-10mm | 0-100 mm |
Direkomendasikan Reaksi Waktu (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Jumlah UltraNuclease (Konsentrasi Akhir) | Waktu Reaksi |
| 0,25 U/mL | >10 jam |
| 2,5 U/mL | >4 jam |
| 25 U/mL | 30 menit |
Catatan:
Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda!
