Rnase A
Ribonuklease A(RNaseA) adalah polipeptida untai tunggal yang mengandung 4 ikatan disulfida dengan berat molekul sekitar 13,7 kDa.RNase Aadalah endoribonuklease yang secara khusus mendegradasi RNA untai tunggal pada residu C dan U.Secara khusus, pembelahan tersebut mengenali ikatan fosfodiester yang dibentuk oleh 5'-ribosa suatu nukleotida dan gugus fosfat pada 3'-ribosa dari nukleotida pirimidin yang berdekatan, sehingga 2,3'-siklik fosfat dihidrolisis menjadi 3 yang sesuai. 'nukleosida fosfat (misalnya, pG-pG-pC-pA-pG dibelah oleh RNase A untuk menghasilkan pG-pG-pCp dan A-PG).RNase A adalah yang paling aktif dalam membelah RNA beruntai tunggal.Konsentrasi kerja yang direkomendasikan adalah 1-100 μG/mL, kompatibel dengan berbagai sistem reaksi.Konsentrasi garam rendah (0-100 mM NaCl) dapat digunakan untuk memotong RNA untai tunggal, RNA untai ganda, dan rantai RNA yang dibentuk oleh hibridisasi RNA-DNA.
Namun, pada konsentrasi garam tinggi (≥0,3 M),RNase A hanya secara spesifik memotong RNA untai tunggal.
RNase A paling sering digunakan untuk menghilangkan RNA selama persiapan DNA plasmid atau DNA genom.Aktif atau tidaknya DNase selama proses preparasi dapat dengan mudah mempengaruhi reaksi.Metode tradisional yaitu merebus dalam penangas air dapat digunakan untuk menonaktifkan aktivitas DNase.Produk ini tidak mengandung DNase dan protease, dan tidak memerlukan perlakuan panas sebelum digunakan.Selain itu, produk ini juga dapat digunakan dalam eksperimen biologi molekuler seperti analisis proteksi RNase dan analisis sekuens RNA.
Kondisi penyimpanan
Produk harus disimpan pada -25℃~-15℃ selama 2 tahun.
Spesifikasi
| Penampilan | Bubuk |
| Kuantitas | 100mg / 1g |
| Tipe produk | RNase A |
instruksi
Ini adalah salah satu metode umum untuk menyiapkan larutan penyimpanan RNase A.Itu juga bisa disiapkandengan metode lain sesuai dengan metode tradisional di laboratorium atau literatur referensi (sepertilangsung larut dalam 10 mM Tris-HCl, pH 7,5 atau larutan Tris-NaCl)
1. Gunakan 10 mM natrium asetat (pH 5,2) untuk menyiapkan 10 mg/mL larutan penyimpanan RNase A.
2. Pemanasan pada suhu 100 ℃ selama 15 menit.
3. Dinginkan suhu ruang,tambahkan 1/10 volume 1 M Tris-HCl (pH 7,4), sesuaikan pH-nya menjadi 7,4 (untukMisalnya, tambahkan 500 mL larutan penyimpanan RNase 10 mg/mL 1 M Tris-HCl, pH7,4).
4. Sub-paket pada suhu -20℃ untuk penyimpanan beku, yang dapat stabil hingga 2 tahun.
[Catatan]:
Saat merebus larutan RNaseA dalam kondisi netral, presipitasi RNase akan terbentuk;Rebus pada pH yang lebih rendah, dan jika terjadi pengendapan dapat diamati, yang mungkin disebabkan oleh adanya pengotor protein.Jika ditemukan sedimen setelah perebusan, kotoran dapat dihilangkan dengan sentrifugasi kecepatan tinggi (13000rpm), dan kemudian dikemas untuk penyimpanan beku.
Catatan
Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda.
