Fosfatase Alkali (ALP)
Keterangan
Alkaline Phosphatase berasal dari strain E. coli rekombinan yang membawa gen TAB5.Enzim ini mengkatalisis defosforilasi ujung 5´ dan 3´ fosfomonoester DNA dan RNA.Selain itu, ia menghidrolisis ribosa, serta deoksiribonukleosida trifosfat (NTPs dan dNTPs).TAB5 Alkaline Phosphatase bekerja pada 5´ ujung yang menonjol, 5´ yang tersembunyi dan tumpul.Fosfatase dapat digunakan dalam banyak aplikasi biologi molekuler, seperti kloning atau pelabelan ujung probe untuk menghilangkan ujung DNA atau RNA yang terfosforilasi.Dalam percobaan kloning, defosforilasi mencegah DNA plasmid yang dilinearisasi dari self-ligation.Ini juga dapat mendegradasi dNTP yang tidak berhubungan dalam reaksi PCR untuk menyiapkan templat untuk pengurutan DNA.Enzim ini dinonaktifkan sepenuhnya dan ireversibel dengan pemanasan pada suhu 70°C selama 5 menit, sehingga menghilangkan fosfatase sebelum ligasi atau pelabelan akhir tidak diperlukan.
Penggunaan
1.Alkaline fosfatase yang digabungkan dengan protein (antibodi, streptavidin, dll.) dapat secara spesifik mengidentifikasi molekul target, dan dapat digunakan dalam ELISA, WB, dan deteksi histokimia;
2.Alkaline fosfatase dapat digunakan untuk mendefosforisasi terminal 5' DNA atau RNA untuk mencegah self-linking;
3. DNA atau RNA yang mengalami defosforilasi di atas dapat diberi label dengan fosfat berlabel radio (melalui T4 poli-nukleotida kinase)
Struktur kimia
Spesifikasi
| Item Tes | Spesifikasi |
| Aktivitas Enzim | 5U/μL |
| Aktivitas Endonuklease | Tidak terdeteksi |
| Aktivitas Eksonukleasi | Tidak terdeteksi |
| Aktivitas Menjilat | Tidak terdeteksi |
| Aktivitas RNase | Tidak terdeteksi |
| DNA E.coli | ≤1salinan/5U |
| Endotoksin | Uji LAL, ≤10EU/mg |
| Kemurnian | ≥95% |
Transportasi dan penyimpanan
Angkutan:Sekelilingnya
Penyimpanan :Simpan pada suhu 2-8°C
Tes ulang yang disarankanKehidupan:2 tahun
