Peroksidase (sumber lobak) Sinonim: Hidrogen peroksida oksidoreduktase;HRP
Keterangan
Horseradish peroxidase (HRP) diisolasi dari akar lobak (Amoracia rusticana) dan termasuk dalam kelompok peroksidase ferroprotoporphyrin.HRP mudah bergabung dengan hidrogen peroksida (H2O2).Kompleks [HRP-H2O2] yang dihasilkan dapat mengoksidasi berbagai macam donor hidrogen:
Donor + H2O2 → Donor Teroksidasi + 2 H2O
HRP akan mengoksidasi berbagai substrat (lihat Tabel 1):
• Kromogenik
• Chemiluminescent (seperti luminol atau isoluminol)
• Fluorogenik (seperti tiramin, asam homovanilat, atau asam 4-hidroksifenil asetat)
HRP adalah polipeptida rantai tunggal yang mengandung empat jembatan disulfida.HRP adalah glikoprotein yang mengandung 18% karbohidrat.Komposisi karbohidrat terdiri dari galaktosa, arabinosa, xilosa, fukosa, manosa, mannosamin, dan galaktosamin, tergantung pada isozim spesifiknya.
HRP adalah label yang banyak digunakan untuk imunoglobulin dalam berbagai aplikasi imunokimia, termasuk imunoblotting, imunohistokimia, dan ELISA.HRP dapat dikonjugasikan menjadi antibodi melalui beberapa metode berbeda, termasuk glutaraldehid, oksidasi periodat, melalui ikatan disulfida, dan juga melalui ikatan silang terarah amino dan tiol.HRP adalah label antibodi yang paling diinginkan, karena merupakan label enzim terkecil dan paling stabil dari tiga label enzim paling populer (peroksidase, β-galaktosidase, alkaline fosfatase) dan glikosilasinya menyebabkan pengikatan non-spesifik yang lebih rendah.Tinjauan tentang glutaraldehid dan metode konjugasi periodat telah dipublikasikan.
Peroksidase juga digunakan untuk penentuan glukosa4 dan peroksida dalam larutan.Beberapa publikasi, 6-24 tesis, 25-29 dan disertasi 30-46 mengutip penggunaan P8375 dalam protokol penelitian mereka.
Struktur kimia
Spesifikasi
Item Tes | Spesifikasi |
Keterangan | Bubuk amorf berwarna coklat kemerahan, terliofilisasi |
Aktivitas | ≥100U/mg |
Kemurnian (SDS-PAGE) | ≥90% |
Kelarutan (10mg bubuk/ml) | Jernih |
Mengandung enzim | |
NADH/NADPH oksidase | ≤0,1% |
Katalase | ≤0,005% |
ATPase | ≤0,03% |
Transportasi dan penyimpanan
Angkutan:Dikirim pada suhu di bawah 2-8°C
Penyimpanan:Simpan pada suhu -20°C (Jangka panjang), 2-8°C (Jangka pendek)
Tes ulang yang disarankanKehidupan:2 tahun