Premix Hijau RT-qPCR SYBR Satu Langkah
Nomor Kucing: HCB5140A
One Step RT-qPCR Syber Green Premix adalah untuk kuantifikasi fluoresensi berdasarkan pewarna SYBR Green I.Dengan menggunakan primer spesifik gen, transkripsi balik dan reaksi qPCR diselesaikan dalam satu tabung, sehingga menghilangkan kebutuhan akan operasi pembukaan tutup dan pemipaan yang berulang, sehingga sangat meningkatkan efisiensi pengujian dan mengurangi risiko kontaminasi.Untuk sampel RNA, kit ini menggunakan Reverse Transcriptase yang tahan panas untuk sintesis cDNA yang efisien dan HotStart Taq DNA Polymerase untuk amplifikasi kuantitatif.Di bawah sistem buffer yang dioptimalkan, sensitivitas kit dapat mencapai 0,1 pg untuk target dengan ekspresi tinggi dan hingga 1 pg untuk target dengan ekspresi sedang.Kit ini cocok untuk amplifikasi dan kuantifikasi sampel DNA.Hal ini memungkinkan deteksi sensitif dan kuantifikasi asam nukleat dari berbagai sampel tanaman dan hewan, sel dan mikroorganisme.
Komponen
| No | Nama | Volume | Volume |
| 1 | Penyangga Tingkat Lanjut | 250 μL | 2×1,25 mL |
| 2 | Campuran Enzim Tingkat Lanjut | 20 μL | 200 μL |
| 3 | Bebas RNase H2O | 250 μL | 2×1,25 mL |
Kondisi penyimpanan
Produk ini harus disimpan pada suhu -25~-15℃ dari cahaya selama 1 tahun.
instruksi
1.Konfigurasi sistem reaksid
| Komponen | Volume (µL) | Volume (µL) | Konsentrasi akhir |
| Penyangga Tingkat Lanjut | 12.5 | 25 | 1× |
| Campuran Enzim Tingkat Lanjut | 1 | 2 | - |
| Primer Maju (10 mol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 mol/L |
| Primer Terbalik (10 mol/L)a | 0,5 | 1 | 0,2 mol/L |
| Templat RNAb | X | X | - |
| Bebas RNase H2HAIc | sampai 25 | sampai 50 | - |
Catatan:
1) sebuah.TKonsentrasi primer akhir adalah 0,2 mol/L, yang juga dapat disesuaikan antara 0,1 dan 1 mol/L jika diperlukan.
2) dgn B.Reagen ini sangat sensitif, dengan Total RNA dalam kisaran 1pg-1μg, dan pengujian sampel manusia menunjukkan masukan optimal 1 pg-100 ng, mengendalikan nilai Ct keseluruhan dalam kisaran 15-30 sebagaimana mestinya.
3) c.Disarankan untuk menggunakan 20μL atau 50μL untuk memastikan validitas dan reproduktifitas amplifikasi gen target.
4) d.Harap bersiap di bangku ultra-bersih dan gunakan ujung dan tabung reaksi bebas residu nuklease;tip dengan kartrid filter direkomendasikan.Hindari kontaminasi silang dan kontaminasi aerosol.
2.Program reaksi
| Langkah siklus | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Membalikkan transkripsi | 50℃a | 6 menit | 1 |
| Denaturasi awal | 95℃ | 5 menit | 1 |
| Reaksi amplifikasi | 95℃ | 15 detik | 40 |
| 60℃b | 30 detik | ||
| Tahap kurva leleh | Default Instrumen | 1 | |
Catatan:
1) sebuah.Suhu transkripsi balik dapat dipilih antara 50-55°C sesuai dengan kebutuhan eksperimental.Untuk sampel DNA, proses transkripsi terbalik dapat dihilangkan.
2) dgn B.Dalam kasus khusus, suhu anil/ekstensi dapat diatur sesuai dengan nilai Tm primer, direkomendasikan 60°C.
Catatan
1. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
2. Harap beroperasi dengan jas lab dan sarung tangan sekali pakai, demi keselamatan Anda.
