Probe RT-qPCR Satu Langkah Cepat Premix-UNG
Nomor Kucing: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) adalah kit deteksi cepat RT-qPCR berbasis probe yang cocok untuk PCR kuantitatif plex tunggal atau multipleks yang menggunakan RNA sebagai templat (seperti virus RNA).Produk ini menggunakan generasi baru Taq DNA Polymerase yang dimodifikasi antibodi dan Reverse Transcriptase khusus satu langkah, dengan buffer yang dioptimalkan untuk amplifikasi cepat, yang memiliki kecepatan amplifikasi lebih cepat, efisiensi dan spesifisitas amplifikasi lebih tinggi.Ini mendukung amplifikasi seimbang dalam sampel konsentrasi rendah dan tinggi dalam satu kompleks dan multipleks dalam waktu singkat.
Komponen
1. Penyangga 5×RT-qPCR (U+)
2. Campuran enzim (U+)
Catatan:
A.Buffer 5×RT-qPCR (U+) termasuk dNTP dan Mg2+;
B.Campuran enzim (U+) meliputi transkriptase balik, Hot Start Taq DNA polimerase, penghambat RNase dan UDG;
C.Gunakan tip Bebas RNase, tabung EP, dll.
Sebelum digunakan, campurkan buffer 5×RT-qPCR (U+) secara menyeluruh.Jika ada endapan setelah pencairan, tunggu hingga buffer kembali ke suhu kamar, campur dan larutkan, lalu gunakan seperti biasa.
Kondisi penyimpanan
Produk dikirim dengan es kering dan dapat disimpan pada suhu -25~-15℃ selama 1 tahun.
instruksi
1. Reaksi Sistem
| Komponen | Volume (20 μL reaksi) |
| 2 × penyangga RT-qPCR | 4μL |
| Campuran enzim (U+) | 0,8μL |
| Primer Maju | 0,1~ 1,0μM |
| Primer Terbalik | 0,1~ 1,0μM |
| Penyelidikan TaqMan | 0,05~0,25μM |
| Templat | X μL |
| Air Bebas RNase | hingga 25μL |
Catatan: Volume reaksi adalah 10-50μL.
2. Protokol Bersepeda (Standard)
| Siklus melangkah | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Transkripsi Terbalik | 55℃ | 10 menit | 1 |
| Denaturasi Awal | 95℃ | 30 detik | 1 |
| Denaturasi | 95℃ | 10 detik | 45 |
| Anil/Ekstensi | 60℃ | 30 detik |
| Protokol Bersepeda (Cepat) Siklus melangkah |
Suhu. |
Waktu |
Siklus |
| Transkripsi Terbalik | 55℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi Awal | 95℃ | 5 detik | 1 |
| Denaturasi | 95℃ | 3 detik | 43 |
| Anil/Ekstensi | 60℃ | 10 detik |
Catatan:
A.Suhu transkripsi terbalik adalah antara 50℃ hingga 60℃, meningkatkan suhu membantu memperkuat struktur kompleks dan templat konten CG tinggi;
B.Suhu annealing yang optimal perlu disesuaikan berdasarkan nilai Tm primer, dan memilih waktu terpendek untuk pengumpulan sinyal fluoresensi berdasarkan instrumen Real Time PCR.
Catatan
Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda!
