2×HiF Taq plus Campuran Utama
Nomor Kucing: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (Dengan Pewarna) adalah larutan 2×premix siap pakai yang mengandung Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs, dan buffer yang dioptimalkan.Dua antibodi monoklonal pada suhu kamar yang menghambat aktivitas polimerase dan aktivitas 3′→5′eksonuklease ditambahkan ke campuran utama untuk Hot Start PCR yang mudah dan sangat spesifik.Faktor ekstensi ditambahkan ke campuran induk untuk memberikan enzim kapasitas amplifikasi fragmen yang panjang, panjang amplifikasi bisa mencapai 13 kb, enzim memiliki aktivitas DNA polimerase 5′→3′ dan aktivitas DNA polimerase 3′→5′ Aktivitas eksonuklease, kesetiaannya 83 kali lipat dari DNA polimerase Taq, yaitu 9 kali lipat dari DNA polimerase biasa.Sangat cocok untuk amplifikasi templat yang rumit, produk amplifikasinya adalah ujung yang tumpul.
2×HIF Taq plus Master Mix (Dengan Pewarna) memiliki keunggulan cepat dan mudah, sensitivitas tinggi, spesifisitas kuat, stabilitas baik, dll., sistem reaksi hanya perlu menambahkan primer dan templat, dan dapat diperkuat dengan dua- protokol langkah, menyederhanakan langkah-langkah eksperimental dan menghemat waktu.Produk ini mengandung pewarna indikator elektroforesis, dan produk PCR dapat digunakan langsung untuk elektroforesis.Selain itu, produk ini juga mengandung bahan pelindung khusus, sehingga master mix dapat mempertahankan aktivitas stabil setelah pembekuan-pencairan berulang kali.
Kondisi penyimpanan
Produk harus disimpan pada suhu -25~-15℃ selama 1 tahun.
Spesifikasi
| Spesifikasi produk | Campuran Utama |
| Konsentrasi | 2× |
| Mulai Panas | Mulai Panas bawaan |
| menggantung | Tumpul |
| Kecepatan reaksi | Cepat |
| Ukuran (Produk Akhir) | Hingga 13kb |
| Kondisi transportasi | Es kering |
| Tipe produk | Premix PCR dengan ketelitian tinggi |
instruksi
1.Sistem Reaksi PCR
| Komponen | Volume (µL) |
| Templat DNA | Sesuai |
| Primer maju (10 mol/L) | 2.5 |
| Primer Terbalik (10 mol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq plus Campuran Utama | 25 |
| ddH2O | sampai 50 |
2.Disarankan penggunaan templat yang berbeda
| Jenis templat | Perkuat fragmen dari 1kb menjadi 10 kb |
| DNA genom | 50ng-200ng |
| DNA Plasmid atau Virus | 10hal-20ng |
| cDNA | 1-2,5 µL (Jangan melebihi 10% dari volume akhir reaksi PCR) |
3.Protokol Amplifikasi
1) Protokol Dua Langkah (templat kompleksitas)
| Langkah siklus | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Denaturasi awal | 98℃ | 3 menit | 1 |
| Denaturasi | 98℃ | 10 detik | 30-35 |
| Perpanjangan | 68℃ | 30 detik/kb | |
| Perpanjangan terakhir | 72℃ | 5 menit | 1 |
2) Protokol Tiga Langkah (protokol reguler)
| Langkah siklus | Suhu. | Waktu | Siklus |
| Denaturasi awal | 98℃ | 3 menit | 1 |
| Denaturasi | 98℃ | 10 detik | 30-35 |
| anil | 60℃ | 20 detik | |
| Perpanjangan | 72℃ | 30 detik/kb | |
| Perpanjangan terakhir | 72℃ | 5 menit | 1 |
3) Annealing Gradient Protocol (templat kompleksitas)
| Langkah siklus | Suhu | Waktu | Siklus |
| Denaturasi awal | 98℃ | 3 menit | 1 |
| Denaturasi | 98℃ | 10 detik | 15 (pengurangan 1℃ per siklus) |
| Anil gradien | 70-55℃ | 20 detik | |
| Perpanjangan | 72℃ | 30 detik/kb | |
| Denaturasi | 98℃ | 10 detik |
20 |
| anil | 55℃ | 20 detik | |
| Perpanjangan | 72℃ | 30 detik/kb | |
| Perpanjangan terakhir | 72℃ | 5 menit | 1 |
Fitur di bawah protokol amplifikasi yang berbeda
| protokoll | Dua langkah | Tiga langkah | Anil gradien |
| Spesifikasi. | cepat | sedang | lambat |
| Kekhususan | tinggi | sedang | tinggi |
| hasil PCR | sedang | tinggi | sedang |
| Tingkat deteksi | tinggi | sedang | tinggi |
Catatan
Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda!
