2×PCR Super Mix (dengan Pewarna)
2× PCR Master Mix mengandung Taq DNA Polymerase, dNTPs, dan komponen lain yang memerlukan PCR.Master Mix stabil selama 3 bulan pada suhu 4℃ dengan stabilisator khusus kami.Solusi pra-campuran dioptimalkan untuk PCR konvensional dan siap digunakan dengan menambahkan templat DNA dan primer.Produk PCR dapat dimuat secara langsung untuk elektroforesis dengan pewarna biru bromofenol yang telah dimuat sebelumnya.Produk yang diperkuat mengandung tonjolan 3 '-dA dan dapat dengan mudah dikloning ke vektor T.Campuran Master 2×PCR menyederhanakan prosedur PCR dan mengurangi kontaminasi.
Kondisi penyimpanan
Produk harus disimpan pada -25℃~-15℃ selama 2 tahun.
Spesifikasi
Kesetiaan (vs.Taq) | 1× |
Mulai Panas | No |
menggantung | 3 '-A |
Polimerase | Taq DNA Polimerase |
Format Reaksi | SuperMix atau Campuran Utama |
Kecepatan Reaksi | Standar |
tipe produk | Campuran Utama PCR (2x) |
instruksi
1.Sistem Reaksi
Komponen | Volume(μL) |
Templat DNA | Sesuai |
Primer 1 (10 mol/L) | 2 |
Primer 2 (10 mol/L) | 2 |
2× Campuran Utama PCR | 25 |
ddH2O | sampai 50 |
2.Protokol Amplifikasi
Langkah siklus | Suhu (°C) | Waktu | Siklus |
Denaturasi awal | 94 | 5 menit | 1 |
Denaturasi | 94 | 30 detik | 35 |
anil | 50-60 | 30 detik | |
Perpanjangan | 72 | 30-60 detik/kb | |
Perpanjangan terakhir | 72 | 10 menit | 1 |
Catatan:
1) Penggunaan templat: DNA genom 50-200ng;DNA plasmid 0,1-10ng.
2) Mg2+konsentrasi: Produk ini mengandung 3mM MgCl2, cocok untuk sebagian besar reaksi PCR.
3) Suhu anil: Silakan merujuk pada nilai Tm teoritis primer.Suhu anil dapat diatur ke 2-5℃ lebih rendah dari nilai teoritis primer.
4) Waktu perpanjangan: Untuk identifikasi molekuler, disarankan 30 detik/kb.Untuk kloning gen, disarankan 60 detik/kb.
Catatan
1.Produk PCR dengan 2× PCR Master Mix tidak cocok untuk elektroforesis gel poliakrilamida.
2.Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai untuk pengoperasian.
3.Ini hanya digunakan untuk keperluan penelitian saja!