Campuran Master Warna-warni RT-LAMP HCB5204A
Produk ini mengandung buffer reaksi, Campuran RT-Enzim (DNA polimerase Bst dan transkriptase balik tahan panas), Pelindung terliofilisasi, dan komponen pewarna kromogenik.Untuk menggunakannya cukup menggunakan Buffer, enzim reaksi dan primer dicampur dan ditambahkan ke template;menambahkan pelindung terliofilisasi bisa lurus.Itu dihubungkan ke lyophilizer dan diliofilisasi, dan hanya primer dan templat yang ditambahkan saat digunakan.Kit ini memberikan deteksi amplifikasi secara visual yang cepat dan jelas, dimana reaksi negatif ditandai dengan warna merah dan reaksi positif ditunjukkan dengan perubahan menjadi kuning.
Komponen
| Komponen | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Buffer Amplifikasi yang dimediasi loop (dengan pewarna) | 0,96 ml | 4,80 mL×2 | 9,60 mL×10 |
| Campuran RT-Enzim | 270 μL | 2,70 ml | 2,70 mL×10 |
| Pelindung terliofilisasi | 0,96 mL×2 | 9,60 mL×2 | 9,60 mL×20 |
Aplikasi
Untuk amplifikasi isotermal DNA atau RNA.
Kondisi penyimpanan
Diangkut dengan es kering, disimpan pada suhu -25~ -15℃.Hindari seringnya freeze-thaw, produk ini berlaku selama 12 bulan.
Protokol
1.Cairkan buffer reaksi untuk digunakan pada suhu kamar.Vortex sebentar atau balikkan tabung beberapa kali agar tercampur rata, lalu sentrifugasi untuk mengumpulkan cairan ke dasar tabung.
2.Persiapan sistem reaksi.Reagen ini dapat dibuat dalam dua sistem reaksi, campuran reaksi cair dan campuran sistem terliofilisasi.
1) Siapkan campuran reaksi cair
| Komponen | Volume |
| Buffer Amplifikasi yang dimediasi loop (dengan pewarna) | 10 μL |
| Campuran RT-Enzim | 2,8 μL |
| 10 × Campuran Primera | 5 μL |
| Templat DNA/RNA b | × μL |
| Air Bebas Nuklir | Hingga 50 μL |
2) Campuran sistem liofilisasi
① Siapkan campuran lyophilized
| Komponen | Volume |
| Buffer Amplifikasi yang dimediasi loop (dengan pewarna) | 10 μL |
| Pelindung terliofilisasi | 20 μL |
| Campuran RT-Enzim | 2,8 μL |
| Air Bebas Nuklir | Hingga 50 μL |
② Liofilisasi: Campuran yang disiapkan diliofilisasi dalam sistem 50μL
③ Siapkan campuran reaksi
| Komponen | Volume |
| Campuran terliofilisasi | 1 buah |
| 10 × Campuran Primera | 5 μL |
| Templat DNA/RNA b | × μL |
| Air Bebas Nuklir | Hingga 50 μL |
Catatan:
1) sebuah.10×Campuran Primer : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) dgn B.DEPC (larut dalam air) direkomendasikan untuk suhu asam nukleat.
1.Inkubasi pada suhu 65°C selama 30-45 menit, yang dapat diperpanjang sesuai dengan perubahan warna Waktu reaksi.
2.Secara kasat mata kuning itu positif dan merah negatif.
Catatan
1.Garam mungkin muncul di dasar tabung penyangga, vorteks sebentar atau balikkan tabung beberapa kali agar tercampur rata pada suhu kamar.
2.Suhu reaksi dapat dioptimalkan antara 62 ℃ dan 68 ℃ sesuai dengan kondisi primer.
3.Reagen yang dikemas tidak boleh terkena udara dalam waktu lama.
4.Reaksi perubahan warna merah dan kuning tergantung pada perubahan pH sistem reaksi, mohon jangan gunakan larutan penyimpanan asam nukleat yang mengandung Tris, disarankan menggunakan ddH2HAI asam nukleat yang disimpan;
5.Percobaan harus distandarisasi, termasuk persiapan sistem reaksi, liofilisasi, dan pemrosesan sampel serta proses penambahan sampel;
6.Untuk menghindari kontaminasi, disarankan untuk menyiapkan sistem reaksi di tempat yang sangat bersih, di tempat lain. Tambahkan templat ke lemari asam ruangan untuk menghindari interferensi positif palsu.
