Premix RT-qPCR Satu Langkah Multipleks
Keterangan
Nomor Kucing: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix adalah Kit PCR kuantitatif multipleks berdasarkan RNA sebagai templat.Dalam percobaan ini, transkripsi balik dan PCR kuantitatif dilakukan dalam tabung reaksi yang sama, menyederhanakan operasi eksperimental dan mengurangi risiko kontaminasi.Desain unik dari campuran buffer dan enzim dapat digunakan dalam sistem liofilisasi satu langkah.Kit ini menggunakan Reverse Transcriptase yang tahan panas untuk sintesis cDNA untai pertama yang efisien menggunakan hotstart Taq DNA Polymerase untuk amplifikasi kuantitatif.Ini berisi buffer reaksi yang dioptimalkan, campuran enzim, dll., dan faktor-faktor yang secara efektif menghambat amplifikasi PCR non-spesifik dan meningkatkan efisiensi amplifikasi beberapa reaksi qPCR ditambahkan, memungkinkan amplifikasi kuantitatif fluoresensi ganda sekaligus memastikan efisiensi amplifikasi primer.
Komponen
| Nama |
| 1. Penyangga Lyo |
| 2. Campuran Lyo-Enzim |
| 3. Pelindung Lyo |
Kondisi transportasiion
A: Lyo-buffer dan pelindung: -25~-15℃, umur simpan 1 tahun.
B: Campuran Lyo-enzyme, 2-8 ℃, umur simpan 6 bulan.
Instruksi untuk pengoperasian
1. Sistem Reaksi (Ambil 25μL sebagai contoh)
| Komponen | Volume (µL) | Konsentrasi Akhir |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Campuran Lyo-Enzim | 1 | - |
| Lyo-Pelindung | 8 | - |
| Campuran Primer (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
| Campuran Pemeriksaan (10μM) | 0,5 | 0,05-0,5uM |
| Templat RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Hingga 25 | - |
2. Protokol Bersepeda yang Dioptimalkan
1) Protokol Bersepeda Standar
| Tahap reaksi | Suhu | Waktu | Siklus | |
| 1 | Membalikkan transkripsi | 50°Ca | 10 menit | 1 |
| 2 | Denaturasi awal | 95°C | 5 menit | 1 |
| 3 | Reaksi amplifikasi | 95°C | 15 detik | 45 siklus |
| 60°Cb | 30 detikc |
2) Protokol Bersepeda Cepat
|
| Tahap reaksi | Suhu | Waktu | Siklus |
| 1 | Membalikkan transkripsi | 50°Ca | 2 menit | 1 |
| 2 | Denaturasi awal | 95°C | 2 detik | 1 |
| 3 | Reaksi amplifikasi | 95°C | 1 detik |
45 siklus |
| 60°Cb | 13 detikc |
Catatan:
a) Balik transkripsi: Suhu dapat memilih 42°C atau 50°C selama 10-15 menit.
b) Reaksi amplifikasi: Suhu disesuaikan dengan nilai Tm primer yang dirancang.
C)Fluoresensi sinyal Akuisisi: Silakan atur prosedur eksperimen sesuai dengan persyaratanpanduan instrumen.
Informasi/Spesifikasi Teknis
| Mulai Panas | Start panas bawaan |
| Metode deteksi | Deteksi probe primer |
| metode PCR | RT-qPCR satu langkah |
| Jenis sampel | RNA |
Catatan
1. Produk ini hanya untuk keperluan penelitian.
2. Harap kenakan APD yang diperlukan, seperti jas lab dan sarung tangan, untuk memastikan kesehatan dan keselamatan Anda!
