Bst 2.0 DNA Polymerase (Bebas gliserol, kepadatan tinggi)
Bst DNA polimerase V2 berasal dari Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, yang memiliki aktivitas DNA polimerase 5′→3′ dan aktivitas penggantian rantai yang kuat, tetapi tidak memiliki aktivitas eksonuklease 5′→3′.Bst DNA Polymerase V2 idealnya cocok untuk perpindahan untai, LAMP amplifikasi isotermal (Amplifikasi isotermal yang dimediasi loop) dan pengurutan cepat.Bst DNA polimerase V2 ini mampu menghambat aktivitas DNA polimerase pada suhu kamar, sehingga dapat dioperasikan dan sistem reaksi dapat diformulasikan pada suhu kamar, mencegah amplifikasi non-spesifik dan meningkatkan efisiensi reaksi, dan versi ini dapat menjadi terliofilisasi.Selain itu, ia mampu melepaskan aktivitasnya pada suhu tinggi, sehingga menghilangkan kebutuhan akan langkah aktivasi terpisah.
Komponen
| Komponen | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA polimerase V2 (Bebas gliserol) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| Penyangga 10×HC Bst V2 | 1,5 ml | 2×1,5 mL | 3×10 mL |
| MgSO4 (100mm) | 1,5 ml | 2×1,5 mL | 2×10 mL |
Aplikasi
1.Amplifikasi isotermal LAMPU
2.Reaksi perpindahan tunggal untai DNA
3.Urutan gen GC tinggi
4.Urutan DNA tingkat nanogram.
Kondisi penyimpanan
Transportasi di bawah 0°C dan disimpan pada -25°C~-15°C.
Definisi Satuan
Satu unit didefinisikan sebagai jumlah enzim yang menggabungkan 25 nmol dNTP ke dalam bahan tidak larut asam dalam 30 menit pada suhu 65°C.
Reaksi LAMPU
| Komponen | 25 μLSistem |
| Penyangga 10×HC Bst V2 | 2,5 μL |
| MgSO4 (100mm) | 1,5 μL |
| dNTP (masing-masing 10mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Hijau (25×)a | 1,0 μL |
| Campuran primerb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (Bebas Gliserol) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Templat | × μL |
| ddH₂O | Hingga 25 μL |
Catatan:
1) sebuah.SYTOTM 16 Hijau (25×): Sesuai dengan kebutuhan percobaan, pewarna lain dapat digunakan sebagai pengganti;
2) dgn B.Campuran primer: diperoleh dengan mencampurkan 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2,5 µM F3, 2,5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB dan volume lainnya.
Reaksi dan Kondisi
1 × Buffer HC Bst V2, suhu inkubasi antara 60°C dan 65°C.
Inaktivasi Panas
80°C, 20 menit.
