Alkalin Fosfatase (ALP)

Alkaline Phosphatase berasal dari strain E. coli rekombinan yang membawa gen TAB5.Enzim mengkatalisasi defosforilasi ujung 5' dan 3' DNA dan RNA fosfomonoester.Selain itu, ia menghidrolisis ribosa, serta deoksiribonukleosida trifosfat (NTP dan dNTP).TAB5 Alkaline Phosphatase bekerja pada ujung 5' menonjol, 5' tersembunyi dan tumpul.Fosfatase dapat digunakan dalam banyak aplikasi biologi molekuler, seperti kloning atau pelabelan ujung probe untuk menghilangkan ujung DNA atau RNA yang terfosforilasi.Dalam percobaan kloning, defosforilasi mencegah DNA plasmid yang terlinearisasi dari self-ligation.Itu juga dapat menurunkan dNTP yang tidak tergabung dalam reaksi PCR untuk menyiapkan templat untuk sekuensing DNA.Enzim diinaktivasi secara sempurna dan ireversibel dengan pemanasan pada suhu 70°C selama 5 menit, sehingga menghilangkan fosfatase sebelum ligasi atau pelabelan akhir tidak diperlukan.