2×PCR Master Mix (tanpa Pewarna)
PCR Master Mix adalah sejenis larutan pra-campuran PCR konvensional yang siap pakai, termasuk Taq DNA Polymerase, campuran dNTP MgCl2 dan buffer yang dioptimalkan.Selama reaksi, hanya primer dan templat yang dapat ditambahkan untuk amplifikasi, yang sangat menyederhanakan langkah-langkah pengoperasian percobaan.Produk ini mengandung stabilisator yang sangat baik dan dapat disimpan selama 3 bulan pada suhu 4℃.Produk PCR memiliki tonjolan 3′-dA dan dapat dengan mudah diklon ke vektor T.
Kondisi penyimpanan
Produk harus disimpan pada -25℃~ -15℃ selama dua tahun.
Spesifikasi
| Kesetiaan (vs.Taq) | 1× |
| Mulai Panas | No |
| menggantung | 3′-A |
| Polimerase | Taq DNA Polimerase |
| Format Reaksi | SuperMix atau Campuran Utama |
| Kecepatan Reaksi | Standar |
| tipe produk | Campuran Utama PCR (2×) |
instruksi
1.Sistem Reaksi
| Komponen | Ukuran (μL) |
| Templat DNA | Sesuai |
| Primer 1 (10 mol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 mol/L) | 2 |
| Campuran Utama PCR | 25 |
| ddH2O | Sampai 50 |
2.Protokol Amplifikasi
| Langkah siklus | Suhu (°C) | Waktu | Siklus |
| Pra-denaturasi | 94℃ | 5 menit | 1 |
| Denaturasi | 94℃ | 30 detik | 35 |
| anil | 50-60℃ | 30 detik | |
| Perpanjangan | 72℃ | 30-60 detik/kb | |
| Perpanjangan Terakhir | 72℃ | 10 menit | 1 |
Catatan:
1) Penggunaan templat: DNA genom 50-200 ng;0,1- 10 ng DNA plasmid.
2) Mg2+konsentrasi: Produk ini mengandung 3 mM MgCl2 yang cocok untuk sebagian besar reaksi PCR.
3) Suhu anil: Silakan merujuk pada nilai Tm teoritis Primer.Suhu anil dapat diatur ke 2-5 ℃ lebih rendah dari nilai teoritis primer.
4) Waktu perpanjangan: Untuk identifikasi molekuler, disarankan 30 detik/kb.Untuk kloning gen, 60detik/kb direkomendasikan.
Catatan
1.Demi keselamatan dan kesehatan Anda, harap kenakan jas lab dan sarung tangan sekali pakai untuk pengoperasian.
2.Hanya untuk penggunaan penelitian!
